GB 4789.2-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定 01 稀釋度的選擇 液體樣品可直接取原液進行檢驗;固體或者半固體則必須依據(jù)檢驗經(jīng)驗,選取2-3個適宜稀釋度進行檢驗(
GB 4789.2-2016
液體樣品可直接取原液進行檢驗;固體或者半固體則必須依據(jù)檢驗經(jīng)驗,選取2-3個適宜稀釋度進行檢驗(一般樣品選取1:10,1:100,1:1000三個稀釋度進行檢驗。若遇到不常做的樣品,可適當(dāng)延長稀釋度至1:10000甚至更大)。
分別吸取1mL滅菌生理鹽水到平皿中做空白對照,若空白有菌落生長則該實驗無效。
根據(jù)對樣品污染情況的估計,若樣品有表面蔓延生長的可能性,則待第一次傾注的瓊脂凝固后,可在表面再覆蓋一層瓊脂以避免菌落蔓延而難以計數(shù)。
本標(biāo)準(zhǔn)的難點在于菌落計數(shù)及計算。
1)菌落計數(shù)時,從低稀釋度的平板開始計數(shù)。若所有平板上的菌落數(shù)均小于30CFU,則需計數(shù)所有平板上的菌落數(shù),但僅采用最接近30CFU的兩個平板的菌落數(shù)來計算最終菌落數(shù)。
2)當(dāng)?shù)谝幌♂屘荻纫粋€板上菌落數(shù)高于30,另一個低于30,則依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)以介于30-300之間的菌落數(shù)作為該稀釋梯度的菌落數(shù)。
3)若所有平板上的菌落數(shù)均大于30CFU,則只計數(shù)30-300CFU之間的平板上的菌落數(shù),并采用這些數(shù)據(jù),依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)中給出的公式,進行最終菌落總數(shù)的計算,此時將大于300CFU的記為“多不可計”,以TNTC表示。
4)若所有稀釋度的平均菌落數(shù)都大于300,則不能所有都記為TNTC,必須將最高稀釋度的兩個平板上的菌落數(shù)逐一的計數(shù),再計算平均數(shù),該平均數(shù)為該梯度的菌落總數(shù),其余平板上的菌落數(shù)可記為TNTC。
5)若所有平板均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)。
注意:對于該情況,一直存在爭議,不同的檢驗人員可能做法不一,有人保留為5CFU,有人保留為10CFU,并無固定做法,建議實驗室保持一貫做法,不要隨意更改。
GB 4789.15-2016
1)孟加拉紅培養(yǎng)基滅菌條件比較特殊:121℃,20min;
2)稀釋液可選擇生理鹽水、硝酸鹽緩沖液,還可以選擇無菌水;
3)正置平板培養(yǎng)。未避免孢子擴散、菌落蔓延,可選擇使用一次性塑料培養(yǎng)皿;
4)“觀察并記錄培養(yǎng)至第5d的結(jié)果”,意味著需要從培養(yǎng)的第二天開始逐日觀察并記錄霉菌和(或)酵母的生長情況,且原始記錄須體現(xiàn)“逐日觀察”;
GB 4789.3-2016
建議新手們認(rèn)真按照標(biāo)準(zhǔn)進行證實實驗,此證實實驗操作簡單,每一次VRBA上有菌落生長都進行證實實驗,如此往復(fù)3-4次,對于哪種形態(tài)才是大腸菌群均可了然于心。
選取15-150CFU之間的平板,挑選可疑菌落進行證實實驗。舉例如下:
注意:A. 每種可疑菌落挑取5個,每個菌落放入1根GBLB管中;B. “產(chǎn)氣者,記為大腸菌群陽性管‘’,就要求在實驗前必須認(rèn)真篩選BGLB管,凡產(chǎn)氣的GBLB管應(yīng)棄去不用。
選取適宜菌落數(shù)的平板挑取菌落進行證實試驗,若證實全部為陰性,則需要再挑取更低稀釋度的平板上的菌落,建議可疑和典型菌落分別挑取10個進行驗證試驗,若第二次證實實驗均呈陰性,以<1乘以最低稀釋度進行計算。
來源:食品論壇網(wǎng)友轉(zhuǎn)載分享
Copyright 2015-2016 山西山陽生物藥業(yè)有限公司 版權(quán)所有 晉ICP備18010233號-1 互聯(lián)網(wǎng)藥品信息服務(wù)(蘇)-非經(jīng)營性-2013-0066